Клетки мутанты, машина с фургоном
31 января 6 февраля 2006
Понедельник. Поставил радиоактивный ПЦР, провел электрофорез продуктов в полиакриламидном геле. Надеялся получить результат к семинару. Не успел.
На семинаре доложил о том, что сделал, обещал результат после семинара. Представил дальнейший план. Я немного рисковал. Ведь дальнейший план зависел от этого результата. Но во мне была необычайная уверенность, что все будет хорошо. И смело рассказал о дальнейшем плане.
А далее шел основной эксперимент в этом эксперименте я планирую показать, если дрожжевые клетки-мутанты, у которых поврежден ген RPN4, кодирующий белок Rpn4, ввести плазмиду с полным геном RPN4, то гены, контролируемые белком Rpn4, восстановят свою работу, т.е. количество мРНК, которое с них образуется, будет таким же, как у клеток дикого типа с работающим геном RPN4. И параллельно посмотреть, возобновится ли работа этих же генов, если в клетки-мутанты ввести плазмиду, в которой содержится не полный ген RPN4, у которого удалена область кодирующая первые 209 аминокислотных остатков белка.
Шеф немного удивился, успею ли я это сделать за неделю. Я утвердительно кивнул. Ведь у меня уже были готовы клетки, трансформированные этими плазмидами.
Вечером получил результат. Мне он не очень понравился. Результат было сложно обсчитать. На завтра запланировал переделать опыт.
Вторник. Повторил вчерашний эксперимента. В итоге получилось, что в одних пробирках реакция прошла, а в других нет! Почему?! Не может быть такого! Может, испортился буфер для реакции? Странные результаты в этот получились не только у меня. Хотя настроение немного испортилось, но я решил особо не волноваться, а в свободное время опыт еще раз повторить. Начал следующий эксперимент. Посеял ночную культуру дрожжевых клеток.
Среда. Сегодня я вырастил культуру до нужной фазы и выделил РНК.
Четверг. Сделал электрофорез РНК. Все хорошо. Поставил синтез кДНК.
Пятница. Утром заплатил за общежитие. Поставил контрольный ПЦР. Все хорошо. К вечеру оба прибора для ПЦР были заняты, да и к тому же появилась сильная усталость, поэтому решил основной эксперимент перенести на завтра.
Суббота. Поставил основной опыт. Почему-то опять в одних пробах был хороший сигнал, а в других слабый. Полученные данные решил обработать в понедельник.
Посидел в Интернете, ответил на почту.
Воскресенье. В институт не пошел, решил отдохнуть. Попробовал сделать блины Не получилось, т.к. хорошие конфорки на плитах были заняты, а которые были свободны не давали нужного тепла.
Встретился с Варей, попили чая, потанцевали, поговорили о жизни.
Из сломанной тумбочки сделал полочки в шкафу, чтобы больше вещей помещалось. Позвонила мама и сказала, что они переезжают в новый недавно купленный дом. После разговора я тут же вспомнил сон. Мне снилось, что я выхожу из своего дома, а на улице стоит машина с большим фургоном, а в нем мебель из нашего дома. И какая-то тоска появлялась.
Этот сон повторялся у меня несколько раз и теперь он сбылся.
Продолжение следует
